Método de concentración por sedimentación RITCHIE.

Fundamentos

Este método se utiliza  para el diagnóstico de parasitosis intestinales leves o moderadas.

  El empleo de éter y formaldehido, permite con el primero, liberar las formas parasitarias de las grasas, por disolución de las mismas y con el formol se fijan y conservan. La concentración se hace por centrifugaciones sucesivas. Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinado. 

 Es efectivo aún en heces con cantidades  excesivas de grasas. Sin embrago, durante la sedimentación, aparte de concentrarse los  parásitos, se quedan reunidos también algunos otros materiales.  Es un método de concentración fecal muy parecido al de Faust, la única diferencia es que en  esta técnica se sedimentará en el fondo la materia fecal a examinar, y es útil para encontrar   huevecillos, quistes y trofozoitos muy pesados.

Material y equipo                                                              

·       Tubos  de ensaye cónicos de 15ml                            

·       Gasa                                                                        

·       Embudo                                                                     

·       Aplicadores

·       Pipeta Pasteur con bulbo

·       Cubre objetos

·       Porta objetos

·       Microscopio

·       Centrifuga

soluciones  

·         soluc. salina isotonica

·         soluc.de formaldehido

·         eter

Método

1.    Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. De materia fecal en el vaso de precipitado, se añade 10 ml de solución salina y se homogeniza.

2.    Se filtra la suspensión atreves de la gasa colocando en el embudo, se recoge el filtrado en el tubo cónico.

3.    Se centrifuga la suspensión durante 2 min a 2000rpm.

4.    Se decanta el sobrenadante y se re suspende el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y re suspendiendo 2 veces más.

5.    Al último sedimento se agregan 5ml de solución de formaldehido al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10min.

6.    Se añaden después 0.5ml de éter, se tapa el tubo con tapón de caucho y se agita enérgicamente durante 30 segundos.

7.    Se centrifuga durante 2 minutos a 2000rpm.

8.    Después de centrifugar se observaran 4 capas:

ü  Éter en la superficie.

ü  Un tapón  de restos fecales.

ü  Formaldehido.

ü  Sedimento en fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitológicos.

9.    Se decanta el sobrenadante.

10. Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae una gota de sedimento y se cola en un porta objetos.

11. Se le añade una gota de lugol y con uno de los ángulos de un cubre objetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.

12. Se observa la preparación con los objetivos de 10xy 40x.

 

Observaciones: en el estudio microscópico que se le realizo ala muestra pudimos observar la presencia de fibras y quiste.

comentarios: es una muy buena tecnica  para observar  huevecillos, quistes y trofozoitos  en esta ocasion  pudimos visualisar lo esperado. La presencia de quistes es mas bisible en una muestra  de dearrea o en donde hay presencia de moco y sangrado.